生物安全柜使用半年后，您是否遇到过这种情况：操作区洁净度突然下降，培养皿出现污染，但安全柜面板显示一切正常；或者年检时第三方出具"高效过滤器泄漏超标"报告，厂家说"过滤器没坏，是测试方法不对"；又或者更换过滤器后没有做完整性检测，半年后实验室发生交叉感染，追溯原因是过滤器边框密封失效。这类问题的根源在于：高效过滤器（HEPA，对0.3μm颗粒过滤效率≥99.97%的空气过滤装置）的完整性不仅取决于滤纸本身，还受安装密封、运输震动、使用老化等多因素影响，必须通过PAO/DOP测试定期验证。
这篇文章整理了生物安全柜高效过滤器完整性检测的核心内容——PAO/DOP测试原理、标准值、操作步骤、合格判定依据和不合格处理方法，文末附一份检测报告模板，可以直接打印带到现场逐项填写。您花5分钟看完，可以对照自己实验室的安全柜年检或验收流程，避免因检测缺失导致的安全风险。发"安全柜型号+检测结果"，免费帮您判断过滤器是否合格：15018770887（微信同号）
PAO/DOP测试是在高效过滤器上游（安全柜内部送风侧）发生特定浓度的气溶胶（悬浮在气体中的固态或液态微粒），然后用气溶胶光度计（一种测量气溶胶浓度的仪器）在过滤器下游（送风面）逐点扫描，检测是否有气溶胶穿透过滤器。如果有穿透，说明过滤器存在泄漏（滤纸破损或边框密封失效）。
"PAO"和"DOP"是两种常用的气溶胶发生液：
| 发生液类型 | 化学名称 | 适用标准 | 当前使用情况 |
|---|---|---|---|
| PAO | 聚α烯烃（Polyalphaolefin） | ISO 14644, GB 50591 | 主流使用，替代DOP |
| DOP | 邻苯二甲酸二辛酯（Dioctyl Phthalate） | 早期美国标准 | 逐步淘汰（有致癌风险） |
| Ondina EL | 矿物油基气溶胶 | 欧洲EN标准 | 部分欧洲设备使用 |
PAO和DOP的测试原理相同，区别仅在发生液的化学成分。目前国内新建实验室和年检普遍采用PAO法，DOP法在逐步淘汰。本文后续统一使用"PAO测试"表述。
高效过滤器有3种损坏方式，靠目视无法发现：
| 损坏方式 | 原因 | 目视能否发现 | PAO能否检出 |
|---|---|---|---|
| 滤纸微破损 | 运输震动、安装碰擦 | 不能（破口可能只有几毫米） | 能 |
| 边框密封失效 | 密封胶老化、温差变形 | 不能（密封胶在内侧） | 能 |
| 滤纸渐进老化 | 长期受潮、化学腐蚀 | 不能（外观无变化） | 能 |
这3种损坏方式都会导致过滤器泄漏率超标，但外部无法观察到。如果不做PAO测试，操作人员在使用过程中不会察觉到任何异常，但安全柜的防护性能已经下降，可能导致实验样本被污染或操作人员暴露在有害气溶胶中。
如果您还不清楚生物安全柜的基本结构，可以先参考这篇生物安全柜核心结构与技术配置，了解高效过滤器在安全柜中的位置和作用，再对照本文的检测方法。
PAO测试的合格判定基于"穿透率"——即下游检测到的气溶胶浓度占上游浓度的百分比：
| 检测项目 | 标准值 | 判定依据 |
|---|---|---|
| 过滤效率 | ≥ 99.99% | 对0.3μm PAO气溶胶的过滤效率不低于99.99% |
| 穿透率 | ≤ 0.01% | 下游浓度 ≤ 上游浓度的0.01% |
| 局部扫描泄漏率 | ≤ 0.01% | 逐点扫描，每点穿透率不超过0.01% |
| 整体泄漏率 | ≤ 0.005% | 全过滤面积平均穿透率不超过0.005% |
合格判定依据：局部扫描时，任何一点的穿透率超过0.01%即为不合格；整体平均穿透率超过0.005%即为不合格。
| 安全柜等级 | PAO检测要求 | 检测周期 | 适用标准 |
|---|---|---|---|
| A2型 | 送风HEPA + 排风HEPA均需检测 | 安装后/移动后/更换过滤器后/每年 | YY 0569-2011, NSF/ANSI 49 |
| B2型 | 送风HEPA + 排风HEPA均需检测（排风2级串联） | 同上 | 同上 |
| A1型 | 送风HEPA需检测，排风无HEPA | 同上 | 同上 |
B2型安全柜的排风系统有2级HEPA串联，检测时2级过滤器都要测，工作量约为A2型的2倍。关于A2型和B2型安全柜的详细参数差异，可以参考这篇A2/B2二级生物安全柜选型参数对照表，了解两种型号的配置区别。
| 准备项 | 要求 |
|---|---|
| 安全柜状态 | 风机运行30分钟以上，达到稳定送风状态 |
| 环境条件 | 温度20±5℃，相对湿度≤75%，室内无强烈气流扰动 |
| 操作人员 | 佩戴防护面罩和手套，PAO气溶胶有刺激性 |
| 测试设备 | 气溶胶发生器（上游发尘用）、气溶胶光度计（上下游浓度测量用）、采样探头 |
| 上游浓度设定 | 10-200 μg/L（微克每升），常用设定值约20 μg/L |
在安全柜送风机与高效过滤器之间的管道上找到注入口（通常有预留检测孔）
将气溶胶发生器连接到注入口，开启发生器
调节发生器流量，使上游浓度稳定在20 μg/L左右
用光度计测量上游浓度，记录基准值（记为C0）
等待3-5分钟，确认上游浓度稳定（波动≤5%）
下游扫描是PAO测试的核心环节，需要使用采样探头在过滤器送风面逐点检测：
将光度计切换到"扫描"模式，采样流量28.3 L/min
采样探头使用等动力采样头（开口面积约3cm²，保证采样气流与过滤面风速匹配）
将探头贴近过滤器送风面，距离1-2cm
扫描路径：从左到右、从上到下，逐行扫描
扫描速度：不超过5cm/s（每秒移动不超过5厘米）
探头覆盖宽度：每次扫描宽度约2cm，相邻扫描路径重叠1cm（确保全覆盖）
扫描范围：整个过滤器送风面 + 过滤器边框四周（边框泄漏是常见故障点）
如果某点读数突然升高，停留10秒确认是否稳定，记录该点穿透率
标注泄漏点位置（用记号笔在过滤器框架上标记）
扫描路径示意图：
| 扫描区域 | 覆盖范围 | 测点数（参考） |
|---|---|---|
| 过滤器中心区 | 整个滤纸面积 | 约20-30个扫描条 |
| 过滤器边框 | 四周边框与箱体接缝处 | 四周各1条 |
| 过滤器与密封胶交界 | 密封胶内侧一圈 | 1圈连续扫描 |
记录每点的穿透率（下游浓度 ÷ 上游浓度 × 100%）
所有点穿透率均≤0.01%：合格
任何一点穿透率＞0.01%：不合格
标注不合格点的位置和穿透率数值
填写检测报告，包括：检测日期、安全柜型号、过滤器型号、上游浓度、各测点穿透率、判定结果
以下整理了PAO测试中5类常见不合格现象，以及对应的处理方法：
| 不合格现象 | 可能原因 | 处理方法 | 处理后复测 |
|---|---|---|---|
| 滤纸中心局部泄漏 | 运输震动导致滤纸微破损 | 更换高效过滤器 | 更换后重新PAO测试 |
| 边框四周泄漏（连续多点） | 密封胶老化或施工缺陷 | 铲除旧密封胶，重新打胶固化 | 固化后重新PAO测试 |
| 过滤器与箱体接缝泄漏 | 压紧螺栓松动或密封垫老化 | 拧紧压紧螺栓或更换密封垫 | 复测该区域 |
| 整体穿透率偏高（无局部泄漏点） | 过滤器等级不足（H13而非H14）或滤纸老化 | 更换符合等级要求的过滤器 | 更换后重新PAO测试 |
| 排风HEPA泄漏（B2型） | 排风过滤器长期受腐蚀性气体侵蚀 | 更换排风HEPA过滤器 | 更换后重新PAO测试 |
处理不合格项时需要注意：更换过滤器后必须重新做PAO测试，不能只做安装检查就投入使用。有些厂家在更换后只做风速和洁净度测试，不做PAO测试，这是不合规的——因为新过滤器在运输和安装过程中也可能发生损坏。
PAO测试不是一次性的验收检测，而是一项需要定期执行的维护检测：
| 检测时机 | 检测要求 | 执行方 |
|---|---|---|
| 安装后 | 送风+排风HEPA全检 | 厂家或第三方检测机构 |
| 移动后（位置变更） | 送风+排风HEPA全检 | 厂家或第三方 |
| 更换过滤器后 | 新装过滤器全检 | 厂家或第三方 |
| 常规年检 | 每年至少1次，送风+排风HEPA全检 | 第三方检测机构 |
| 维修后（涉及过滤系统） | 涉及部位全检 | 厂家或第三方 |
年检通常建议在安全柜投入使用满12个月时进行。如果安全柜使用频率高（每日8小时以上运行）或处理高危害样本（如结核杆菌培养），建议缩短至6个月1次。
关于生物安全柜的选型和适用场景，可以参考这篇如何选择合适的实验室生物安全柜，了解不同实验类型对应的安全柜等级要求。
以下模板整合了PAO测试的核心记录项，检测时可以打印带到现场逐项填写：
| 序号 | 记录项 | 内容 |
|---|---|---|
| 1 | 安全柜型号 | ____型（A1/A2/B2） |
| 2 | 安全柜编号 | ____________ |
| 3 | 送风HEPA型号 | ____________ |
| 4 | 排风HEPA型号 | ____________（B2型填写） |
| 5 | 检测日期 | ____年__月__日 |
| 6 | 上游浓度（C0） | ____ μg/L |
| 7 | 扫描总点数 | ____ 点 |
| 8 | 泄漏点数（穿透率＞0.01%） | ____ 点 |
| 9 | 泄漏点位置标注 | □中心区 □边框 □接缝 □无泄漏 |
| 10 | 整体穿透率 | ____% |
| 11 | 判定结果 | □合格 □不合格 |
| 12 | 不合格处理方案 | ____________ |
| 13 | 复测结果 | □合格 □不合格 |
| 14 | 检测人员签字 | ____________ |
| 15 | 使用方确认签字 | ____________ |
PAO测试可以由厂家执行或第三方检测机构执行，两者的区别如下：
| 对比项 | 厂家检测 | 第三方检测机构 |
|---|---|---|
| 检测费用 | 通常免费（质保期内） | 800-2,000元/台 |
| 检测报告效力 | 厂家内部报告 | 具备CMA/CNAS资质的检测报告 |
| 适用场景 | 安装验收、更换过滤器后 | 年检、GMP检查、认证评审 |
| 报告认可度 | 供内部参考 | 监管部门、评审机构认可 |
选择建议：
安装后验收：由厂家检测并出具报告，确认过滤器安装合格即可投入使用
常规年检：由第三方检测机构执行，出具CMA/CNAS报告，满足监管要求
GMP/实验室认证：必须由第三方机构执行，厂家报告不被认可
更换过滤器后：由厂家检测确认安装合格，再安排第三方复测出具报告
如果您的安全柜需要通过GMP检查或实验室资质评审，建议每年由第三方机构做PAO测试并出具报告。关于安全柜选型时是否需要与配套，可以参考这篇生物安全柜选型指南：是否需要与通风系统配套，了解排风系统配置要求。
| 对比项 | PAO测试 | 洁净度检测 |
|---|---|---|
| 检测对象 | 过滤器本身是否有泄漏 | 操作区空气中的粒子浓度 |
| 检测方法 | 上游注入气溶胶，下游扫描 | 粒子计数器直接采样 |
| 能发现的问题 | 滤纸破损、边框密封失效 | 操作区整体洁净度是否达标 |
| 能否替代对方 | 不能（洁净度合格≠过滤器无泄漏） | 不能（洁净度合格不代表过滤器完整） |
两者不能互相替代。洁净度检测合格但PAO不合格的情况是存在的：过滤器有微泄漏，但由于送风量较大，泄漏的气溶胶被稀释，洁净度仍然达标。但这种微泄漏会随时间扩大，进而导致洁净度不合格。因此PAO测试是预防性检测，洁净度检测是结果性检测。
| 使用场景 | 建议更换周期 | 判定依据 |
|---|---|---|
| 常规实验室（每日8h以下） | 3-5年 | 风速下降至设计值80%以下 |
| 高频使用（每日8h以上） | 2-3年 | 风速下降或PAO不合格 |
| 腐蚀性环境（化学操作） | 1-2年 | 滤纸受腐蚀，PAO不合格 |
| 高生物危害（结核、HIV等） | 2-3年 | PAO年检结果 |
更换周期的判定不是只看时间，主要看两个指标：风速是否下降至设计值80%以下，或PAO测试是否不合格。两个指标任一触发，就需要更换过滤器。
不建议自行检测。原因有3点：
PAO气溶胶有刺激性，操作人员需要防护面罩和通风条件
气溶胶发生器和光度计需要定期校准，自行检测的数据不具备报告效力
自检结果不被GMP检查和实验室评审认可
建议由厂家或第三方机构执行PAO测试并出具报告。如果您需要过滤器更换服务，发安全柜型号到 15018770887（微信同号），30分钟内发您更换方案和报价。
以上检测标准参考GB 50591-2010《洁净室施工及验收规范》、YY 0569-2011《生物安全柜》、NSF/ANSI 49及ISO 14644相关条款整理，具体标准值以设备说明书和合同约定为准。如需PAO检测报告模板电子版或检测流程咨询，请联系15018770887（微信同号）。
粤公网安备44000000000000号
